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Western Blot样本取材要求
(一)新鲜组织
1.操作时带手套、口罩、帽子(须无菌操作,避免样本污染)。
2.取材器械事先进行高压灭菌,尽量做到无RNA酶,取材时有条件再用酒精灯火焰消毒。
3.取材时间尽可能短(在5分钟内取好一个样本,有血迹可用PBS液或生理盐水冲洗后放入冷冻管中或进口的Eppendorf管,然后再放入液氮中)。
4.组织大小:至少100mg。
(二)血液
1.取血1-2毫升,放入加有4%EDTA-2Na抗凝剂管子中(每1ml血液中加30ul抗凝剂),混匀。
2.加3倍体积的红细胞裂解液,室温放置5分钟,间或混匀1次,10000转/分离心1分钟(或2000转/分15分钟),去掉上清。
3.沉淀中加1毫升Trizol,振动混匀,冻在-80℃冰箱,送出时用冰块保存。
(三)细胞
1.细胞数目至少1*107。
2.贴壁的细胞用胰酶消化下来,1500转/分离心5分钟去掉上清。冻在-80℃冰箱,送出时用液氮保存。
蛋白质学检测
项目 |
价格 |
备注 |
蛋白提取 |
50元/个 |
包括所有试剂 |
Western Blot检测 |
1500元/张膜 |
一抗另计,提供分析数据、图片、步骤。 |
内参检测 |
500元/张膜 |
包括所有试剂,提供分析数据、图片、步骤。 |